Extracellular production of avicelase by the thermophilic soil bacterium Bacillus sp SMIA-2 / Produção de avicelase extracelular pela bactéria termofílica Bacillus sp SMIA-2

Nowadays, the isolation of new bacterial strains that produce enzymes with novel properties is a subject of great relevance to the scientific community. This study, in order to search for producers of new cellulase strains, investigated the avicelase production by thermophilic Bacillus sp. strain SMIA-2. The best avicelase activity was observed in a culture medium containing 0.5% (w v-1) avicel and 0.5% (w v-1) corn steep liquor with initial pH 7.5- 8.0 incubated at 50 oC. When avicel was replaced in the medium by the treated sugarcane bagasse (0.5%, w v-1) the avicelase activity levels were not affected. Studies on the avicelase characterization revealed that the optimum pH of the enzyme was found to be 8.5 and the enzyme retained more than 80% of its activity after incubation at room temperature for 2h at pH 6.5-8.5. The optimum temperature of this enzyme was 70oC and the enzyme retained 67% of the original activity after 20 min. of heat treatment at 70oC. Avicelase was stimulated by Mn2+ and Co2+, whereas Hg2+ greatly inhibited the enzyme activity.

Atualmente, o isolamento de estirpes de bactérias que produzem enzimas com novas propriedades é um tema de grande relevância para a comunidade científica. Este trabalho, buscando por novas cepas produtoras de celulases, investigou a produção de avicelases pelo termofílico Bacillus sp. cepa SMIA-2. A melhor atividade da enzima foi obtida em uma cultura contendo 0,5% (p v-1) avicel e 0,5% (p v-1) água de maceração de milho com pH inicial de pH 7,5-8,0 e incubada a 50oC. A substituição da avicel no meio de cultura pelo bagaço de cana- de- açúcar tratado (0,5%, p v-1) não afetou os níveis de atividade da avicelase. Estudos sobre a caracterização da avicelase revelaram que o pH para atividade ótima da enzima foi 8,5 e que a mesma reteve mais de 80% de sua atividade após ser incubada à temperatura ambiente por 2 h a pH 6,5-8,5. A temperatura ótima da avicelase foi 70oC e a enzima reteve 67% da sua atividade original após 20 min. de incubação a 70oC. A avicelase foi estimulada pelos íons Mn2+ e Co2+, ao passo que Hg2+ inibiu a atividade da enzima.

Elimination of coliforms and Salmonella spp. in sheep meat by gamma irradiation treatment

This study aimed at evaluating the bacteriological effects of the treatment of sheep meat contaminated with total coliforms, coliforms at 45 °C and Salmonella spp. by using irradiation at doses of 3 kGy and 5 kGy. Thirty sheep meat samples were collected from animals located in Rio de Janeiro State, Brazil, and then grouped in three lots including 10 samples: non-irradiated (control); irradiated with 3 kGy; and irradiated with 5 kGy. Exposure to gamma radiation in a 137Cs source-driven irradiating facility was perfomed at the Nuclear Defense Section of the Brazilian Army Technological Center (CTEx) in Rio de Janeiro. The samples were kept under freezing temperature (-18 °C) until the analyses, which occurred in two and four months after irradiation. The results were interpreted by comparison with the standards of the current legislation and demonstrated that non-irradiated samples were outside the parameters established by law for all groups of bacteria studied. Gamma irradiation was effective in inactivating those microorganisms at both doses tested and the optimal dose was achieved at 3 kGy. The results have shown not only the need for sanitary conditions improvements in slaughter and processing of sheep meat but also the irradiation effectiveness to eliminate coliform bacteria and Salmonella spp.

Qualidade microbiológica da carne moída comercializada na cidade de Cariacica, ES / Microbiological quality of ground beef commercialized in the city of Cariacica, ES

O município de Cariacica está distribuído em doze regiões geográficas, com mais de 350 mil habitantes, que contam com sessenta supermercados e quarenta e seis açougues e/ou casa de carnes licenciados pela prefeitura. Dentre os diversos produtos comercializados nestes estabelecimentos, estão as carnes bovinas. A carne bovina moída destaca-se entre os produtos cárneos, pela sua aceitação comercial e por se caracterizar como produto popular. Neste estudo, avaliou-se a qualidade microbiológica da carne bovina moída, comercializada na área urbana do município de Cariacica –ES, por meio de metodologias que permite a determinação de coliformes totais e termotolerantes, Escherichia coli e Staphylococcus sp. As determinações microbiológicas foram efetuadas de acordo com metodologias descritas no Manual de Métodos de Analises Microbiológicas de Alimentos descrito por Silva e colaboradores. Os resultados indicam um crescimento acima de 2,4 x 10³ NMP/g em 80,0% das amostras para coliformes totais, sendo que 40,0% das amostras apresentaram um resultado presuntivo para E.coli. Tais achados sugerem a existência de condições inadequadas de manipulação, refrigeração, limpeza de utensílios e demais equipamentos que entraram em contato com o produto.

Qualidade microbiológica de frangos abatidos no Estado do Rio de Janeiro / Microbiological quality of broilers slaughtered in the State of Rio de Janeiro

As doenças de origem alimentar (DOA) são usualmente tóxicas ou infecciosas, causadas por agentes que penetram no hospedeiro através da ingestão de água e alimentos contaminados. Os sintomas são variados, mas vômito e diarréia são comuns. Em países industrializados, que têm sistemas de notificação, o percentual de pessoas com DOA aumenta 30% a cada ano. A salmonelose constitui-se num importante problema sócio-econômico em vários países do mundo, principalmente nos desenvolvidos, pois o agente etiológico desta enfermidade tem sido incriminado como o principal responsável pelos surtos de toxinfecções alimentares. (...) Assim, este trabalho foi realizado com o objetivo de avaliar a qualidade higiênico-sanitária das carcaças e cortes de frango produzidos no estado do Rio de Janeiro. A metodologia utilizada seguiu os padrões estabelecidos pelo Ministério da Agricultura para análise de alimentos de origem animal, segundo Instrução Normativa número 62, de 26 de agosto de 2003. De acordo com as condições deste trabalho, nas análises de Salmonella spp., observou-se que os produtos apresentaram condições sanitárias satisfatórias, estando de acordo com os padrões legais vigentes. Já a presença de coliformes totais em todas as amostras indica que houve práticas higiênicas em desacordo com as necessárias à manipulação dos alimentos.

Qualidade microbiológica de frangos abatidos no Estado do Rio de Janeiro / Microbiological quality of broilers slaughtered in the State of Rio de Janeiro

As doenças de origem alimentar (DOA) são usualmente tóxicas ou infecciosas, causadas por agentes que penetram no hospedeiro através da ingestão de água e alimentos contaminados. Os sintomas são variados, mas vômito e diarréia são comuns. Em países industrializados, que têm sistemas de notificação, o percentual de pessoas com DOA aumenta 30% a cada ano. A salmonelose constitui-se num importante problema sócio-econômico em vários países do mundo, principalmente nos desenvolvidos, pois o agente etiológico desta enfermidade tem sido incriminado como o principal responsável pelos surtos de toxinfecções alimentares. (...) Assim, este trabalho foi realizado com o objetivo de avaliar a qualidade higiênico-sanitária das carcaças e cortes de frango produzidos no estado do Rio de Janeiro. A metodologia utilizada seguiu os padrões estabelecidos pelo Ministério da Agricultura para análise de alimentos de origem animal, segundo Instrução Normativa número 62, de 26 de agosto de 2003. De acordo com as condições deste trabalho, nas análises de Salmonella spp., observou-se que os produtos apresentaram condições sanitárias satisfatórias, estando de acordo com os padrões legais vigentes. Já a presença de coliformes totais em todas as amostras indica que houve práticas higiênicas em desacordo com as necessárias à manipulação dos alimentos. [...]

The illnesses of alimentary origin are usually toxic or infectious, caused for agents who penetrate in the hostthrough the ingestion of water and contaminated foods. The symptoms are varied, but vomit and diarrea arecommon. In industrialized countries, that have notification systems the percentage of people with increaseof illnesses 30% to each year. The microbiological analysis of foods can supply concernentes information tothe quality of the raw material and to the sanitary conditions under which it had the processing of the food, aswell as a effectiveness of the preservation method. Salmonelose consists in. an important partner-economicproblem in some countries of the world, mainly in the developed ones, therefore the etiologic agent of thisdisease has been incriminated as main the responsible one for the cases of alimentary toxinfections. Althoughsalmonelose to be an illness of obligator notification, in Brazil the cases of the illness nor always are notifiedto the sanitary authorities, what it makes it difficult one real evaluation of the existing cases of salmonelose in the country, even so isolated cases are diagnosised. The presence of fecais coliformes bacteria of the group in the food is interpreted as indicating of fecal contamination, that is, of unsatisfactory hygienical-sanitary conditions, indicating a possible occurrence of enteric patógenos. Thus, this work was carried through with the objective to evaluate the hygienical-sanitary quality of the carcasses and produced cuts of chicken in the state of Rio de Janeiro. The used methodology followed the standards established for the Ministry of Agriculture for food analysis of animal origin, according to Normative Instruction number 62, of 26 of August of 2003. In accordance with the conditions of this work, in the analyses of Salmonella spp.,was observed that the products had presented satisfactory sanitary conditions, being in accordance with the effective legal standards. [...]

Avaliação microbiológica da água de coco / Microbiological evaluation of coconut water

A água de coco verde pode ser consumida tanto na forma in natura quanto processada. Os métodos de processamento empregados visam, essencialmente, inibir a ação enzimática e garantir a estabilidade microbiológica após a abertura do fruto, mantendo o quanto possível suas características sensoriais originais. A água de coco dentro de seu invólucro natural pode ser considerada como uma bebida estéril, mas em contato com o ambiente e equipamentos, sem uma devida higienização, pode gerar um produto de péssima qualidade que poderá causar uma série de sintomas devido à presença de micro-organismos patogênicos.(...) Neste trabalho, objetivou-se avaliar a qualidade microbiológica de seis marcas distintas de água de coco comercializadas na cidade de Campos dos Goytacazes-RJ, relacionando-as à contaminação por micro-organismos mesófilos aeróbios, bolores e leveduras, coliformes totais e coliformes termotolerantes em temperatura de refrigeração (7ºC)(...) Os resultados servem de alerta para que os órgãos de Vigilância Sanitária controlem de forma mais intensa a qualidade higiênico-sanitária de água de coco que vem sendo comercializada nas pequenas e médias cidades do Brasil.

Condutividade elétrica como indicador do café despolpado durante a desgomagem / Electric conductivity as indicator of coffee depulped during degumming

Este trabalho foi realizado com o objetivo de avaliar a utilização da variável condutividade elétrica do meio desgomante como um indicador dos procedimentos de manejo do café despolpado durante a desgomagem do grão. Os experimentos foram conduzidos em três propriedades cafeeiras da região sudoeste da Bahia, utilizando Coffea arabica L., variedade Catuai Amarelo, para estudar o efeito de dois manejos de água do meio desgomante, dois manejos de revolvimento da solução desgomante e seis períodos de tempo em esquema fatorial. Um aumento da condutividade elétrica foi observado durante a desgomagem do grão, principalmente, no tratamento com revolvimento do meio. A troca de água do meio desgomante mostrou ser necessária, pois, ao longo da desgomagem, ocorreu um equilíbrio eletroquímico no meio, impedindo que a mucilagem continuasse a ser liberada do grão para o meio. Portanto, por meio da condutividade elétrica do meio, é possível indicar o momento em que se deve realizar a troca de água do tanque de desgomagem.

This research was carried out with the aim to evaluate the use of electric conductivity of the degumming medium as an indicator for management procedures of depulped coffee during degummming of the grain. The experiment was performed in three coffee properties in the Southwest region of Bahia, Brazil, using Coffea arabica L., Yellow Catuai variety. It was studied the effect of two water management of the degumming medium, two management of rummaging of the degumming solution, six time periods in factorial design. An increase on the electrical conductivity values was observed during degumming of coffee grain. Mainly in the treatment where the medium was rummaged. The water change of the degumming medium showed to be necessary since along the degumming process an electro-chemical equilibrium of the medium was achieved, avoiding that the mucilage was liberated from the grain to the medium. Therefore, the electrical conductivity was possible to indicate when the water change from the degumming tank must be done.

Properties of an amylase from thermophilic Bacillus SP

Alpha-Amylase production by thermophilic Bacillus sp strain SMIA-2 cultivated in liquid cultures containing soluble starch as a carbon source and supplemented with 0.05 percent whey protein and 0.2 percent peptone reached a maximum activity at 32 h, with levels of 37 U/mL. Studies on the amylase characterization revealed that the optimum temperature of this enzyme was 90ºC. The enzyme was stable for 1 h at temperatures ranging from 40-50ºC while at 90ºC, 66 percent of its maximum activity was lost. However, in the presence of 5 mM CaCl2, the enzyme was stable at 90ºC for 30 min and retained about 58 percent residual activity after 1 h. The optimum pH of the enzyme was found to be 8.5. After incubation of enzyme for 2 h at pH 9.5 and 11.0 was observed a decrease of about 6.3 percent and 16.5 percent of its original activity. At pH 6.0 the enzyme lost about 36 percent of its original activity. The enzyme was strongly inhibited by Co2+, Cu2+ and Ba2+, but less affected by Mg2+, Na+ and K+. In the presence of 2.0 M NaCl, 63 percent of amylase activity was retained after 2 h incubation at 45ºC. The amylase exhibited more than 70 percent activity when incubated for 1 h at 50ºC with sodium dodecyl sulphate. However, very little residual activity was obtained with sodium hypochlorite and with hydrogen peroxide the enzyme was completely inhibited. The compatibility of Bacillus sp SMIA-2 amylase with certain commercial detergents was shown to be good as the enzyme retained 86 percent, 85 percent and 75 percent of its activity after 20 min incubation at 50ºC in the presence of the detergent brands Omo®, Campeiro® and Tide®, respectively.

A produção de alfa-amilase por um termofilico, Bacillus sp SMIA-2, cultivado em meio l¨ªquido contendo amido sol¨²vel como fonte de carbono, alcançou uma atividade m¨¢xima de 37 U/mL em 32 horas. Estudos sobre a caracterização da amilase revelaram que a temperatura ¨®tima desta enzima foi 90ºC. A enzima foi est¨¢vel por 1 hora a temperaturas de 40 e 50ºC enquanto a 90ºC, 66 por cento da atividade m¨¢xima foi perdida. Entretanto, na presença de 5 mM de CaClð2, a enzima foi est¨¢vel a 90ºC por 30 minutos e manteve cerca de 58 por cento de sua atividade residual por 1 hora. O pH ¨®timo da enzima encontrado foi de 8.5. Ap¨®s a incubação da enzima por 2 horas a pH 9.5 e 11.0 foi observado um decr¨¦scimo de aproximadamente 6.3 por cento e 16.5 por cento da atividade original. Em pH 6.0 a enzima perdeu cerca de 36 por cento de sua atividade original. A enzima foi fortemente inibida por Co2+, Cu2+, e Ba2+, por¨¦m pouco afetada por Mg2+, Na+ e K+. Na presença de 2.0 M de NaCl, 63 por cento da atividade da amilase foi mantida ap¨®s 2 horas de incubação a temperatura de 45ºC. A amilase exibiu atividade acima de 70 por cento quando incubada por 1 hora a 50ºC em presença de s¨®dio dodecil sufato (SDS). Entretanto, uma baixa atividade residual foi obtida quando na presença do hipoclorito de s¨®dio e uma completa inibição quando a enzima foi incubada em per¨®xido de hidrog¨ºnio. A compatibilidade da amilase produzida pelo Bacillus sp SMIA-2, em relação a alguns detergentes comerciais mostrou que a enzima manteve 86 por cento, 85 por cento, e 75 por cento da atividade ap¨®s 20 minutos de incubação a 50ºC na presença dos detergentes Omo®, Campeiro® e Tide®, respectivamente.

Effect of the culture conditions on the production of an extracellular protease by thermophilic Bacillus sp and some properties of the enzymatic activity

Protease production by thermophilic Bacillus sp strain SMIA-2 cultivated in liquid cultures containing 1 percent maltose as a carbon source and supplemented with whey protein (0.1 percent) and corn steep liquor (0.3 percent) reached a maximum at 14 h, with levels of 42 U/mg protein. The microorganism was capable of utilizing a wide range of carbon sources, but protease activity varied according the carbon source. Starch and maltose were the best carbon sources in the present study for protease secretion, while lactose and sucrose were less effective. Increasing maltose concentration in the medium until 1 percent, improved the growth of the organism and the enzyme activity. Regarding the amounts of corn steep liquor and whey protein in the medium, the concentrations of 0.2 percent and 0.1 percent respectively, were considered the most effective for protease secretion by the organism. Studies on the protease characterization revealed that the optimum temperature of this enzyme was 70°C. Thermostability profile indicated that the enzyme retained 80 percent of the original activity after 2 h heat treatment at 60°C. At 70°C, 70 percent of the original activity was retained after 15 min heat treatment. The optimum pH of the enzyme was found to be 8.5. After incubation of crude enzyme solution at room temperature for 2 h at pH 6.0-10.0, a decreased of about 15 percent of its original activity at pH 8.5 was observed. At pH 10.0, the decrease was 24 percent. In the presence of 1.0 M and 5.0 M NaCl, 76 percent and 37 percent of protease activity was retained after 2 h incubating at 45°C respectively.

A produção de proteases pelo termofílico Bacillus sp cepa SMIA-2 cultivado em culturas líquidas contendo maltose (1 por cento) e suplementada com proteínas de soro (0,1 por cento) e água de maceração de milho (0,3 por cento) alcançou o máximo em 14 h, com níveis de 42 U/mg proteína. O microrganismo foi capaz de utilizar várias fontes de carbono, mas a atividade da protease variou com cada fonte. Amido e maltose foram as melhores fontes para a secreção da protease, enquanto lactose e sacarose não foram muito efetivas. O aumento da concentração de maltose no meio de cultura até 1 por cento melhorou o crescimento do organismo e a atividade da enzima. Em relação à concentração de proteínas do soro e da água de maceração de milho no meio de cultura, 0,1 por cento e 0,2 por cento respectivamente, foram as mais efetivas para a secreção da enzima pelo organismo. Estudos sobre a caracterização da protease revelaram que a temperatura ótima desta enzima foi 70°C. Em relação a termoestabilidade da enzima, a protease manteve 80 por cento de sua atividade original após 2 h de tratamento a 60°C. A 70°C, 70 por cento de sua atividade original foi mantida após 15 min. O pH ótimo para atividade da enzima foi 8,5. Após a incubação da solução enzimática bruta a pH 6,0-10.0 por 2 h a temperatura ambiente, foi observado um decréscimo de em torno de 15 por cento da sua atividade original a pH 8,5. A pH 10,0 o decréscimo na atividade foi de 24 por cento. Na presença de 1.0 M e 5.0 M NaCl, 76 por cento e 37 por cento da atividade da protease foi mantida após 2 h de incubação a 45°C respectivamente.

Studies on the stability of protease from Bacillus sp. and its compatibility with commercial detergent

Enzymes, and particularly proteases, have become an important and indispensable part of industrial processes such as laundry detergents, pharmaceuticals and food products. Detergents such as Tide®, Ariel® and Biz® contain proteolytic enzymes, most of them produced by members of the genus Bacillus. This paper describes the compatibility of protease produced by the thermophilic Bacillus sp, with commercial laundry detergent. Stability studies indicated that this enzyme retained about 95 percent and 74 percent of its maximum activity after 1h at 60°C in the presence of glycine in combination with MnSO4 and CaCl2, respectively. No inhibitory effect was observed at 1.0-5.0 mM of EDTA. Triton X-100 inhibited the enzyme in all the concentrations tested. The enzyme was unstable in a 5 percent (v/v) concentration of peroxide solution. The protease retained more than 80 percent and 65 percent of its activity after 30 min incubation at 60°C in the presence of Tide® and Cheer® detergents, respectively. After supplementation of CaCl2 (10 mM) and glycine (1 mM), the enzyme in Tide® detergent retained more than 85 percent of its activity after 1h. Based on these findings, Bacillus sp. protease shows a good potential for application in laundry detergents.

As enzimas, principalmente as proteases, têm uma participação importante e indispensável em muitos processos industriais tais como na indústria farmacêutica, de alimentos e de detergentes. Alguns detergentes como Tide®, Ariel® e Biz® contem enzimas proteolíticas em sua formulação, sendo a maioria produzida por bactérias do gênero Bacillus sp. Neste artigo, foi avaliada a compatibilidade de uma protease produzida por um microrganismo termofílico, Bacillus sp., com alguns detergentes comerciais. Estudos sobre a estabilidade mostraram que a enzima reteve cerca de 95 por cento e 74 por cento de sua máxima atividade após 1h a 60°C na presença de glicina em combinação com MnSO4 e CaCl2 respectivamente. A enzima não foi inibida em presença de 1.0 - 5.0 mM de EDTA. A adição de Triton X-100 inibiu a atividade enzimática em todas as concentrações estudadas. A enzima não foi estável na presença de uma solução a 5 por cento (v/v) de peróxido de hidrogênio. A protease manteve mais de 80 por cento e 65 por cento de atividade após 30 min de incubação na presença dos detergentes Tide® e Cheer® respectivamente. Após adição de CaCl2 (10 mM) e glicina (1 mM), a enzima manteve mais de 85 por cento de atividade após 1 hora de incubação em presença do detergente Tide®. Considerando estas propriedades, a protease de Bacillus sp., pode ser útil na indústria de detergentes.

Avaliação microbiológica de hortaliças provenientes de hortas comunitárias de Campos dos Goytacazes, RJ / Microbiological evaluation of communitarian vegetables proceeding from Campos dos Goytacazes, RJ

O objetivo deste estudo foi investigar a qualidade microbiológica de hortaliças provenientes de diferentes hortas comunitárias da cidade de Campos, Rio de Janeiro, bem como a qualidade da água utilizada na irrigação das mesmas. Além disso, a sensibilidade das cepas de Escherichia coli isoladas das hortaliças a antimicrobianos foi determinada. De acordo com os resultados encontrados, 100 por cento das amostras de hortaliças analisadas estavam contaminadas por coliformes totais, 90 por cento por coliformes fecais e 43,3 por cento foram positivas para E. coli. A incidência de E. coli nas hortaliças foi cerca de mais de 30 por cento superior a da água, indicando que além da contaminação pela água, podem ter existido outras fontes de contaminação das hortaliças. Mais de 80 por cento das cepas de E. coli isoladas das hortaliças, foram sensíveis a tobramicina, cloranfenicol, netilmicina, gentamicina, sulfazotrim, enquanto 61,2 por cento e 50 por cento foram resistentes a cefalotina e à ampicilina, respectivamente.

Avaliação físico-química, microbiológica e de resíduos de penicilina, em leite tipo ôCö comercializado no município de Campos dos Goytacazes, RJ / Physicochemical evaluation, microbiological and of residues of penicillin, in milk kind ôCö traded in Campos dos Goytacazes, RJ

O presente trabalho verificou a ocorrência de resíduos de antibióticos no leite pasteurizado tipo öCö , vendido na cidade de Campos dos Goytacazes, Estado do Rio de Janeiro. Além disso, as características físico-químicas e microbiológicas deste produto foram avaliadas. Durante o período de três meses, 43 amostras foram analisadas e foi encontrada a presença de penicilina G em níveis superiores a 4mg/Kg em 16 amostras (37,21 por cento). As análises microbiológicas revelaram que 25,58 por cento das amostras que foram analisadas não estavam dentro das especificações legais para coliformes totais e fecais.

Production and properties of an extracellular protease from thermophilic Bacillus sp

A produção de protease pelo termofílico Bacillus sp cepa SMIA-2 cultivado em culturas líquidas contendo citrato trissódico alcançou o máximo em 9h, com níveis de 1,93U/mg de proteína. O microrganismo utilizou várias fontes de carbono para a produção da protease, sendo que o amido foi o melhor substrato seguido por citrato trissódico, ácido cítrico e sacarose. Entre as várias fontes de nitrogênio orgânico e inorgânico, o nitrato de amônio foi a melhor. Estudos sobre a caracterização da protease revelaram que a temperatura ótima desta enzima foi 60ºC. A enzima foi estável por 2h a 30ºC, enquanto a 40ºC and 80ºC, 14% e 84% da atividade original foram perdidas, respectivamente. O valor ótimo de pH encontrado para a enzima foi 8,0. Após a incubação da solução enzimática bruta por 24h a pH 5,5, 8,0, e 9,0 foi observado um decréscimo de em torno de 51%, 18% e 66% da sua atividade original, respectivamente. Um forte efeito inibitório foi observado na presença de K+, Hg2+, Cu2+. A presença de Hg+ resultou na perda completa da atividade da enzima na concentração de 1mM. A atividade foi estimulada pela presença do Mn2+ e Ca+2, indicando que estes íons tiveram um papel funcional na estrutura molecular da enzima.

Effect of the medium composition on formation of amylase by Bacillus sp

Studies on the alpha -amylase synthesis was carried out with a moderately thermophilic, facultatively anaerobic Bacillus sp, isolated from soil samples. The cells were cultivated in a complex medium containing soluble starch or maltose as carbon source. The levels of the alpha -amylaseactivity detected in culture supernatants varied greatly with the type of carbon source used. Maltose, soluble starch and citrate stimulated alpha -amylaseformation. Addition of exogenous glucose repressed formation of alpha -amylase, demonstrating that a classical glucose effect was operative in this organism. The concentration of yeast extract was found to be important factor in the alpha -amylase synthesis bythe isolate.The activity of the enzyme increased between 2 and 5 g/L yeast extract concentration and then fell very rapidly beyond this point. The best concentration of peptone to alpha-amylase formation was found to be around 10g/L

Avaliaçäo sensorial e microbiológica do peruá (Balistes capriscus) capturado na regiäo norte fluminense e comercializado no mercado de Campo dos Goytacazes - RJ / Sensorial and microbiological evaluation of peruá (Balistes capriscus) commercialized in free markets of Campos dos Goytacazes - RJ

Considerando o grande consumo de peruá (Balistes capriscus) no norte de estado do Rio de Janeiro e a contaminaçäo microbiológica a que este produto está sujeito, teve por objetivo examinar a qualidade sensorial e microbiológica deste peixe vendido em mercados da cidade de Campos dos Goytacazes. Foi observado que das 12 amostras analisadas, 100 por cento estavam contaminadas por coliformes totais e por microrganismos mesófilos e 75 por cento foram positivas para Escheriria coli, sugerindo que este produto näo está em condiçöes higiênicas e sanitárias satisfatórias, apresentando portanto, riscos para a saúde do consumidor.

Production and properties of a-amylase from thermophilic Bacillus sp

a-amylase (1,4-a-D-glucan glucanohydrolase, EC 3.2.1.1) production by thermophilic Bacillus sp strain SMIA-2 cultivated in liquid media containing soluble starch reached a maximum at 48h, with levels of 57U/mL. Studies on the a-amylase characterization revealed that the optimum temperature for activity was 70§C. The enzyme was stable for 2h at 50§C, while at 60§C, 70§C and 90§C, (4 per cent), 13(per cent) and 38(per cent) of the original activities were lost, respectively. The optimum pH of the enzyme was 7.5. After incubation of crude enzyme solution for 24h at pH 7.5, a decrease of about 5(per cent) of its original activity was observed. The enzyme was strongly inhibited by Co2+, Cu2+ and Ba2+, but less affected by Ca2+, Mg2+, Ni2+, Sr2+ and Mn2+. The enzyme in 1M and 5M NaCl solutions the enzyme retained 70(per cent) and 47(per cent) of the original activity after 24h of incubation at 4§C, respectively.

Isolation, properties and kinetics of growth of thermophilic Bacillus

A strictly aerobic, thermophilic, spore-forming bacteria was isolated from a soil sample collected in Campos dos Goytacazes City, Rio de Janeiro, Brazil. The cells of this organism were Gram-positive, catalase positive, actively motile, 1.2µm wide and 5.3µm long. Growth occurred at pH values ranging from 6.5 to 9.0, and optimum growth occurred at about pH 7.0. The optimum temperature for growth was around 55ºC, and the upper temperature limit for growth was a around 70ºC. Yeast extract stimulated growth on glucose and was obligately required at supraoptimal temperatures (65ºC). The results of 16S rRNA sequence comparisons indicated that the isolate was closely related to Bacillus caldoxylolyticus and Bacillus sp strain AK1, and these three organisms exhibited levels of ribossomal DNA sequence homology of 94 (per cent).

Culture conditions for the production of thermostable amylase by Bacillus sp

Studies on the alfa-amylase production were carried out with a bacterial strain isolated from a soil sample. The cells were cultivated in a mineral medium containing soluble starch as sole carbon source. The addition of calcium (10 mM) or peptone 1(per cent) and yeast extract 0.5(per cent) to the mineral medium shortened the lag period and improved the growth and alfa-amylase synthesis. The addition of glucose to the culture diminished greatly the synthesis of alfa-amylase, demonstrating that a classical glucose effect is operative in this organism. The optimum temperature and initial medium pH for amylase synthesis by the organism were 50ºC and 7.0 respectively. The optimal pH and temperature for activity were 6.0 and 50ºC respectively. The enzyme extract retained 100 per cent activity when incubated for one hour at 90ºC and 40(per cent) at 60ºC for 24 h. The addition of glucose to the culture diminished greatly the synthesis of alfa-amylase.

Influence of the oxygen and growth rate on the metabolic activity of bacillus stearothermophilus grown in glucose-limited cultures

O aumento da taxa de diluiçäo de uma cultura quimiostática de Bacillus stearothermophilus var non-diastaticus, contendo glicose como fonte de carbono para 0,89 h-1 a 50 p/cento de saturaçäo com ar, resultou em aumentos lineares nas taxas de consumo de glicose e oxigênio. Estes dados foram analisados de acordo com a equaçäo de Pirt e foi observado que quando o nível de oxigênio dissolvido diminuiu em funçäo da diminuiçäo da saturaçäo com ar de 50 p/cento para 5 p/cento, o coeficiente da manutençäo (m) para o consumo de oxigênio aumentou e o valor Ymax (produçäo máxima) decresceu. O coeficiente de manutençäo para o consumo de glicose e o valor da produçäo máxima a 50 por cento de saturaçäo com ar foram também calculados, mas quando o nível de oxigênio dissolvido foi abaixado para 5 p/cento de saturaçäo com ar, estes valores näo puderam ser calculados, uma vez que o aumento da taxa de diluiçäo da cultura näo resultou em aumentos lineares no consumo de glicose